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分裂泛素化酵母双杂交系统研究信息素因子STE2蛋白相互作用

阅读量: 2319 山东农业大学学报(自然科学版) 2019年第1期

社会科学

分裂泛素化酵母双杂交系统研究信息素因子STE2蛋白相互作用

真菌的进化、分化及有性发育趋势受若干性别基因的调控,如交配型、信息素因子及异源三聚体G-蛋白ɑ-亚基基因等;同时,信息素因子调控真菌的有性生殖在酿酒酵母中也得到充分研究。匍柄霉属(Stemphylium)是丝状子囊真菌中的一类重要真菌类群,许多丝状子囊真菌属、种中含有信息素因子。在自然界中,匍柄霉属真菌大多数是以无性态的形式存在,但其中也有一小部分存在有性生殖阶段。为了深入研究信息素受体STE2 及其相关基因对匍柄霉属典型种有性生殖的影响,本研究选取含有信息素因子STE2 的匍柄霉属典型种Stemphylium eturmiunum 为试验材料,克隆鉴定了信息素受体STE2,然后将其构建至诱饵蛋白表达载体上,并在cDNA 文库初筛得到数个疑似互作蛋白片段基础上,克隆其基因全长构建至靶蛋白表达载体上,并利用分裂泛素化的膜酵母双杂交系统,进行一对一验证筛选STE2 的相关互作蛋白。该研究筛选出的互作蛋白结果为后期的CO-IP、Poll-Down 实验提供了基础。

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